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Detección de RNA basada en LAMP en Optigene Genie II/III. Sistema de tubo cerrado, amplificación de 30 min a 66 °C, confirmación por curva de anelamiento. Paso 3 del sistema de vigilancia de arbovirus ProAmpRT™ en casa.
Validación independiente
Burkhalter et al., J Med Entomol 2018 (PMID: 29462341)
PLM-1008 es el paso de detección LAMP. Según el procedimiento de IFU:
15 µL de mezcla maestra + 4,975 µL de mezcla de cebadores WNV_E + 0,025 µL de transcriptasa inversa por reacción. Escalar para la corrida + 2 extra. Alicuotar 20 µL en cada pozo de tira de 8 tubos Optigene.
Añadir 5 µL de RNA extraído a cada tubo e inmediatamente tapar. Volumen total de reacción: 25 µL. Utilizar un área de adición de plantilla separada de la configuración previa a amplificación para controlar la contaminación.
Amplificación: 66 °C × 30 min. Anelamiento: 98 °C → 80 °C a 0,05 °C/seg. Examinar curvas de amplificación y pico de anelamiento (WNV positivo: 86,4–88,4 °C).
Fuente: PLM-1008 IFU Ver: 160601
Sin ciclado térmico. Los tubos permanecen cerrados después de la corrida — según la IFU, "no abrir después de la corrida" para prevenir contaminación de amplicones.
Paso de confirmación integrado. El Genie rampa de 98 °C a 80 °C a 0,05 °C/seg; el pico de anelamiento distingue un verdadero WNV positivo de artefactos de amplificación.
Burkhalter et al. (2018) comparó ProAmpRT LAMP, RAMP, y RT-PCR en honey cards; ProAmpRT detectó WNV/ZIKV en múltiples títulos donde RAMP no arrojó positivos.
Responsabilidad de un solo proveedor. Pro-Lab suministra homogeneización, extracción de RNA, y detección LAMP — conjunto IFU completo, un único contacto de soporte técnico.
Si envía pools al laboratorio estatal, el ritmo es el mismo cada temporada: enviar lunes, esperar hasta jueves, y durante la temporada alta el límite puede devolver sus envíos. PLM-1008 cierra el bucle en casa. Agregue 5 µL de RNA extraído a un tubo de mezcla de amplificación, ejecute 30 minutos a 66 °C en el Optigene Genie II/III, lea el pico de annealing (86,4–88,4 °C confirma WNV positivo). Resultado de vigilancia el mismo día, cada pool, cada día.
La configuración es la misma en cada corrida. Descongele la mezcla de cebadores y la mezcla maestra en hielo. Combine: 15 µL Mezcla Maestra + 4,975 µL Mezcla de Cebadores WNV_E + 0,025 µL Transcriptasa Inversa = 20 µL mezcla amp; +5 µL de RNA extraído = 25 µL total. Ejecute en Genie II/III: 66 °C × 30 min, luego annealing 98 °C → 80 °C a 0,05 °C/seg. Lea tanto la curva de amplificación como el pico de annealing. Tubo cerrado — no abra después de la corrida.
Los laboratorios de salud pública necesitan tres cosas para adoptar un método de vigilancia: el protocolo por escrito, una evaluación independiente, y un proveedor que suministre el flujo de trabajo completo. PLM-1008 tiene los tres. El IFU especifica amplificación a 66 °C × 30 min, annealing 98 °C → 80 °C a 0,05 °C/seg, y un pico de annealing a 86,4–88,4 °C como la señal WNV positiva. Burkhalter et al. (2018) comparó ProAmpRT LAMP, RAMP, y RT-PCR en tiempo real en especímenes de honey card; LAMP detectó muestras de WNV/ZIKV que RAMP devolvió como negativas.Solo para Investigación — vigilancia de control de vectores, no diagnóstico clínico de pacientes.
PLM-1008 es el paso de detección. Combínelo con homogeneización ascendente y extracción de RNA del mismo fabricante.
Tubos de 2,0 mL prellenados con bolas de carga y Buffer de Trituración. Pools n ≤ 50, 100 preparaciones por kit.
Placas de extracción precargadas diseñadas para el instrumento Mag Pro-32 — 32 muestras por corrida.
Extracción automatizada de 32 muestras con perlas magnéticas y decontaminación UV integrada.
Extracción de ARN por columna de sílice con protocolo publicado para mosquitos. Flujo de trabajo manual — sin instrumento requerido.
Extracción manual de ARN con perlas magnéticas usando imán de mano. Rendimiento flexible; sin instrumento requerido.
Lector LAMP isotérmico requerido con análisis de amplificación y alineamiento. Especificado por el IFU PLM-1008.
| Especificación | Valor |
|---|---|
| Número de Catálogo | PLM-1008 |
| Tipo de Producto | Kit de Mezcla de Cebadores LAMP (RUO) |
| Designación RUO | "No para Uso Clínico." Solo para Investigación — vigilancia de vectores, no diagnóstico clínico |
| Reacciones por Kit | 100 |
| Contenido del Kit | Pro-AmpRT WNV_E Primer Mix (PLM-1008); Pro-AmpRT Master Mix (PLM-501); Pro-AmpRT Reverse Transcriptase (PLM-500) |
| Configuración por Reacción | 15 µL Master Mix + 4.975 µL WNV_E Primer Mix + 0.025 µL Reverse Transcriptase = 20 µL mezcla de amplificación; +5 µL muestra = 25 µL total |
| Lector de Detección | Optigene Genie II / Genie III |
| Tiras de Tubos | Tiras de 8 Tubos Optigene (cat# OP-0008) |
| Amplificación | 66 °C × 30 min |
| Alineamiento | 98 °C → 80 °C a 0.05 °C/seg |
| Pico de Alineamiento WNV | 86.4 – 88.4 °C |
| Método de Detección | Fluorescencia (tubo cerrado) |
| Espécimen | ARN extraído (del flujo de trabajo ascendente PLM-2008 → PLM-2007 / PLM-2004 / PLM-2000) |
| Envío en Frío | Requerido (nota del fabricante) |
| Clasificación GHS | No clasificado como peligroso según GHS. NFPA: Salud 0 / Fuego 1 / Reactividad 0. Fuente: PLM-500 (Retrotranscriptasa) SDS + PLM-PrimerMix (serie PLM-1000) SDS. Componentes confirmados como no peligrosos según OSHA 29CFR1910.1200 / EU CLP. La química del buffer del producto hermano (PLM-2000 / PLM-2004 IFUs) declara azida sódica 0,05% como conservante — aplica a la mezcla maestra PLM-501; no deseche reactivo sin usar por las tuberías. |
| Fabricante | Pro-Lab Diagnostics USA |
Especificaciones obtenidas de PLM-1008 IFU Ver: 160601. Clasificación de peligro GHS confirmada desde SDSes de componentes PLM-500 (enzima RT) y PLM-PrimerMix — ambos no peligrosos según OSHA / GHS. Almacenamiento y vida útil por SKU pendientes de confirmación de Pro-Lab Diagnostics; consulte el IFU del kit para el manejo específico de componentes.
Precios para su distrito o programa dentro de 1 día hábil.
Demostración de 20 minutos del sistema ProAmpRT — virtual o presencial.
PLM-1008 · 100 reacciones por kit · Consumibles ProAmpRT.
Aplicaciones de control de vectores · (512) 832-9145
Solo para uso en investigación — No para uso en procedimientos de diagnóstico. El Kit Isotérmico Pro-AmpRT WNV (PLM-1008) se designa solo para investigación según el encabezado del IFU (Ver: 160601 — literalmente "No para uso clínico"). El sistema está destinado a vigilancia de control de vectores y salud pública — no para diagnóstico clínico de pacientes. El estudio de Burkhalter et al. (J Med Entomol. 2018; PMID: 29462341) evaluó especímenes de tarjeta de miel, no homogeneizado de piscinas de mosquitos; el desempeño en piscinas de mosquitos puede diferir. La condición de ejecución "amplificación de 30 minutos a 66 °C" es literal del PLM-1008 IFU Ver: 160601.
Una actualización por temporada — nuevas herramientas de vigilancia de arbovirus y orientación de protocolos para programas de control de vectores.
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