html Pro-AmpRT™ WNV Isothermal Kit — LAMP Detection PLM-1008 | Pro-Lab Direct
Pour usage en recherche uniquement — Surveillance du vecteur

Pro-AmpRT™ WNV Isothermal Kit — Détection du virus du Nil occidental in-house en moins de 30 minutes

Détection d'ARN par LAMP sur l'Optigene Genie II/III. Système en tube fermé, amplification de 30 min à 66 °C, confirmation par courbe d'hybridation. Étape 3 du système de surveillance des arbovirus ProAmpRT™ in-house.

check_circle 100 réactions par trousse check_circle Amplification de 30 min à 66 °C check_circle Confirmation d'hybridation 86,4–88,4 °C
Trousse isotherme Pro-AmpRT WNV PLM-1008 — fioles de réactifs, bandelette 8-tubes Optigene, et boîte de bandelettes Genie OP-0008 pour la détection du virus du Nil occidental par LAMP
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Validation indépendante

Burkhalter et al., J Med Entomol 2018 (PMID: 29462341)

science100 réactions / trousse
timerAmplification de 30 minutes
menu_bookValidation indépendante
securityUsage en recherche uniquement

De l'ARN extrait au résultat — In-house, même jour

PLM-1008 est l'étape de détection LAMP. Selon la procédure du MUI :

01
science

Préparer le mélange d'amplification

15 µL de mélange maître + 4,975 µL de mélange d'amorces WNV_E + 0,025 µL de transcriptase inverse par réaction. Ajuster pour le cycle + 2 supplémentaires. Aliquoter 20 µL dans chaque puits de bande de 8 tubes Optigene.

02
water_drop

Ajouter l'échantillon

Ajouter 5 µL d'ARN extrait à chaque tube et refermer immédiatement. Volume de réaction total : 25 µL. Utiliser une zone d'ajout de template distincte de la préparation pré-amplification pour contrôler la contamination.

03
biotech

Exécuter sur Genie II/III

Amplification : 66 °C × 30 min. Hybridation : 98 °C → 80 °C à 0,05 °C/sec. Examiner les courbes d'amplification et le pic d'hybridation (WNV positif : 86,4–88,4 °C).

Source : PLM-1008 MUI Ver : 160601

Pourquoi les programmes de lutte contre les vecteurs choisissent ProAmpRT WNV

LAMP en tube fermé

Amplification isotherme à 66 °C

Aucun cycle thermique. Les tubes restent fermés après l'exécution — selon le MUI, « ne pas ouvrir après l'exécution » pour prévenir la contamination des amplicons.

Confirmation d'hybridation

Pic WNV 86,4–88,4 °C

Étape de confirmation intégrée. Le Genie effectue une rampe de 98 °C à 80 °C à 0,05 °C/sec; le pic d'hybridation distingue un véritable WNV positif des artefacts d'amplification.

Étude indépendante

LAMP a détecté ce que RAMP a manqué (cartes de miel)

Burkhalter et al. (2018) ont comparé ProAmpRT LAMP, RAMP et RT-PCR sur des cartes de miel; ProAmpRT a détecté le WNV/ZIKV à plusieurs titres où RAMP n'a retourné aucun positif.

Flux de travail intégré

PLM-2008 → PLM-2007 → PLM-1008

Responsabilité d'un seul fournisseur. Pro-Lab fournit l'homogénéisation, l'extraction d'ARN et la détection LAMP — ensemble complet du MUI, un seul contact pour le soutien technique.

Conçu pour votre rôle

Détection du virus du Nil occidental in-house le même jour — LAMP en tube fermé, 30 minutes sur le Genie

Si vous envoyez des pools au laboratoire d'État, le rythme est le même chaque saison — soumettre lundi, espérer jeudi, et pendant la période de pointe, le plafond peut rejeter vos soumissions. PLM-1008 ferme la boucle in-house. Ajouter 5 µL d'ARN extrait à un tube de mélange d'amplification, exécuter 30 minutes à 66 °C sur l'Optigene Genie II/III, lire le pic d'hybridation (86,4–88,4 °C confirme WNV positif). Résultat de surveillance le même jour, pour chaque pool, chaque jour.

  • check_circleAmplification de 30 minutes à 66 °C sur Genie II/III — résultat de surveillance le même jour
  • check_circleAucune limite de volume pour les laboratoires d'État lorsque la surveillance fonctionne en interne
  • check_circleÉvaluation indépendante sur carte de miel : LAMP a détecté ce que RAMP a manqué (Burkhalter 2018 ; PMID : 29462341)

LAMP en tube fermé — 25 µL par réaction, 30 minutes, confirmation d'hybridation

La procédure est identique à chaque exécution. Décongeler le mélange d'amorces et le mélange maître sur glace. Combiner : 15 µL de mélange maître + 4,975 µL de mélange d'amorces WNV_E + 0,025 µL de transcriptase inverse = 20 µL de mélange d'amplification ; + 5 µL d'ARN extrait = 25 µL au total. Exécuter sur Genie II/III : 66 °C × 30 min, puis hybridation 98 °C → 80 °C à 0,05 °C/sec. Lire à la fois la courbe d'amplification et le pic d'hybridation. Tube fermé — ne pas ouvrir après l'exécution.

  • check_circleRéactifs fournis : mélange d'amorces WNV_E (PLM-1008), mélange maître (PLM-501), transcriptase inverse (PLM-500)
  • check_circleFourni par l'utilisateur : tubes de 1,5 mL sans RNase/DNase, pointes filtrées, mini centrifugeuse, bandes de 8 tubes Optigene (OP-0008), Genie II/III, support de tube-bande refroidi
  • check_circleLe format en tube fermé réduit le risque de contamination par l'amplicon

Documenté, évalué indépendamment, RUO — surveillance que votre programme peut défendre

Les laboratoires de santé publique ont besoin de trois choses pour adopter une méthode de surveillance : le protocole par écrit, une évaluation indépendante, et un fournisseur qui approvisionne tout le flux de travail. PLM-1008 possède les trois. L'IFU spécifie l'amplification à 66 °C × 30 min, l'hybridation 98 °C → 80 °C à 0,05 °C/sec, et un pic d'hybridation à 86,4–88,4 °C comme signal positif pour le VNO. Burkhalter et coll. (2018) ont comparé ProAmpRT™ LAMP, RAMP et RT-PCR en temps réel sur des spécimens de carte de miel ; LAMP a détecté des échantillons VNO/ZIKV que RAMP a retournés comme négatifs.Pour usage en recherche uniquement — surveillance du contrôle des vecteurs, non diagnostic clinique de patient.

  • check_circleIFU publié (Ver : 160601) — protocole verbatim, plage d'hybridation, contrôles de contamination
  • check_circleÉvaluation indépendante examinée par les pairs : Burkhalter 2018, PMID : 29462341
  • check_circleCouverture complète en amont de l'IFU : PLM-2008 (homogénéisation), PLM-2004 / PLM-2000 (extraction)

Compléter le flux de travail ProAmpRT™

PLM-1008 est l'étape de détection. L'associer avec l'homogénéisation et l'extraction d'ARN en amont du même fabricant.

PLM-2008
Étape 1 · Homogénéisation

Kit de collecte et d'homogénéisation de moustiques

Tubes de 2,0 mL pré-remplis avec billes et tampon de broyage. Pools n ≤ 50, 100 préparations par kit.

Détails
PLM-2007
Étape 2 · Automatisée

Kit d'extraction d'ARN automatisé Mag Pro Plus

Plaques d'extraction pré-chargées conçues pour l'instrument Mag Pro-32 — 32 échantillons par exécution.

Détails
PLM-NPA-32
Instrument · Étape 2

Instrument d'extraction Mag Pro-32

Extraction magnétique automatisée de 32 échantillons avec décontamination UV intégrée.

Détails
PLM-2004
Étape 2 · Colonne de centrifugation

Kit d'extraction d'ARN Pure Pro-Spin™

Extraction d'ARN sur colonne de silice avec protocole de moustique publié. Flux de travail manuel — aucun instrument requis.

Détails
PLM-2000
Étape 2 · Aimant manuel

Kit d'extraction d'ARN Pro-Mag™

Extraction d'ARN par perles magnétiques manuelles avec aimant portatif. Débit flexible ; aucun instrument requis.

Détails
Genie II / III
Lecteur de détection

Optigene Genie II / Genie III

Lecteur LAMP isotherme requis avec analyse d'amplification et d'hybridation. Spécifié par l'IFU PLM-1008.

En savoir plus

Spécifications techniques

SpécificationValeur
Numéro de cataloguePLM-1008
Type de produitLAMP Primer Mix Kit (RUO)
Désignation RUO« Non destiné à un usage clinique. » Recherche uniquement — surveillance des vecteurs, non diagnostic clinique
Réactions par kit100
Contenu du kitPro-AmpRT WNV_E Primer Mix (PLM-1008); Pro-AmpRT Master Mix (PLM-501); Pro-AmpRT Reverse Transcriptase (PLM-500)
Configuration par réaction15 µL Master Mix + 4,975 µL WNV_E Primer Mix + 0,025 µL Reverse Transcriptase = 20 µL mélange d'amplification; + 5 µL échantillon = 25 µL total
Lecteur de détectionOptigene Genie II / Genie III
Tubes en bandesOptigene 8 Tube Strips (n° cat. OP-0008)
Amplification66 °C × 30 min
Hybridation98 °C → 80 °C à 0,05 °C/sec
Pic d'hybridation WNV86,4 – 88,4 °C
Méthode de détectionFluorescence (tube fermé)
SpécimenARN extrait (à partir du flux de travail en amont PLM-2008 → PLM-2007 / PLM-2004 / PLM-2000)
Expédition au froidRequise (note du fabricant)
Classification SGHNon classifié comme dangereux selon le SGH. NFPA : Santé 0 / Feu 1 / Réactivité 0. Source : PLM-500 (Reverse Transcriptase) FDS + PLM-PrimerMix (série PLM-1000) FDS. Composants confirmés non dangereux selon l'OSHA 29CFR1910.1200 / EU CLP. La chimie de tampon du produit similaire (PLM-2000 / PLM-2004 IFUs) divulgue l'azide de sodium 0,05 % comme conservateur — s'applique au master mix PLM-501; ne pas éliminer les réactifs inutilisés dans les égouts.
FabricantPro-Lab Diagnostics USA

Spécifications provenant de la PLM-1008 IFU Ver: 160601. Classification des risques SGH confirmée à partir des FDS du composant PLM-500 (enzyme RT) et PLM-PrimerMix — tous deux non dangereux selon l'OSHA / SGH. Stockage par SKU et durée de conservation en attente de confirmation de Pro-Lab Diagnostics; consulter l'IFU du kit pour la manipulation spécifique aux composants.

Questions fréquemment posées

PLM-1008 est l'étape de détection basée sur LAMP du système de surveillance des arbovirus ProAmpRT. Il contient des amorces LAMP, un master mix et une reverse transcriptase pour l'amplification isotherme en tube fermé du virus du Nil occidental sur le Optigene Genie II/III. 100 réactions par kit. Recherche uniquement.
Amplification de 30 minutes à 66 °C plus analyse d'hybridation (98 °C → 80 °C à 0,05 °C/sec). Source : PLM-1008 IFU Ver: 160601.
Un pic d'hybridation dans la plage 86,4–88,4 °C confirme un résultat positif pour le VNO. Le Genie effectue une rampe de 98 °C à 80 °C à 0,05 °C/sec après l'amplification.
Un lecteur isotherme Optigene Genie II ou Genie III. Les tubes Optigene 8 (n° cat. OP-0008) sont des consommables requis. La page produit fait référence à une instrumentation qPCR générique — confirmez la compatibilité spécifique de la plateforme qPCR auprès du support technique Pro-Lab.
Non. L'en-tête de l'IFU précise « Non destiné à un usage clinique. » ProAmpRT est un système de recherche uniquement destiné à la surveillance de la lutte contre les vecteurs et de la santé publique — non pour le diagnostic clinique du patient. Le diagnostic clinique du patient reste le rôle des dosages IVD agréés dans les laboratoires de référence cliniques.
ARN extrait du flux de travail ProAmpRT en amont : homogénéisation des moustiques (PLM-2008) → extraction d'ARN (PLM-2007 automatisé, PLM-2004 colonne de centrifugation ou PLM-2000 aimant manuel) → détection LAMP (PLM-1008).
LAMP est basé sur l'ARN; RAMP est basé sur l'antigène. Une évaluation indépendante de carte de miel (Burkhalter et coll., J Med Entomol. 2018; PMID: 29462341) a trouvé que ProAmpRT LAMP détectait les échantillons VNO/ZIKV que RAMP retournait comme négatifs. ProAmpRT couvre également EEE, WEE, SLE, LAC et CHIKV via des kits séparés — RAMP ne le fait pas.
Les contrôles ne sont pas inclus. L'IFU indique que des contrôles positifs et négatifs sont « recommandés à chaque run ». Établissez vos propres contrôles positifs (norme commerciale d'ARN WNV) et négatif sans matrice selon votre protocole QC interne.

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Réservé à la recherche — Non destiné aux procédures diagnostiques. La Trousse isotherme Pro-AmpRT WNV (PLM-1008) est désignée Réservé à la recherche selon l'en-tête de l'IFU (Ver: 160601 — verbatim « Non destiné à l'utilisation clinique »). Le système est destiné à la surveillance du contrôle vectoriel et de la santé publique — non au diagnostic clinique des patients. L'étude Burkhalter et al. (J Med Entomol. 2018; PMID: 29462341) a évalué des spécimens de cartes de miel, non des homogénats de pools de moustiques; le rendement dans les pools de moustiques peut différer. La condition de run « amplification de 30 min à 66 °C » est verbatim de l'IFU PLM-1008 Ver: 160601.